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細胞培養(yǎng)實驗室設備配置及細胞培養(yǎng)設備的用途

時間:2021/8/9 13:54:08

目前絕大部分細胞培養(yǎng)設備實驗室使用超凈工作臺實現(xiàn)無菌操作
,具有操作簡單
、安裝方便
、占用空間小且凈化效果很好
。安徽人和凈化為您介紹兩種主要超凈工作臺-側流式(垂直式)和外流式(水平層流式)
1. 超凈工作臺 

        目前絕大部分細胞培養(yǎng)設備實驗室使用超凈工作臺實現(xiàn)無菌操作
,具有操作簡單
、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好
。安徽人和凈化為您介紹兩種主要超凈工作臺-側流式(垂直式)和外流式(水平層流式)
。工作原理一般是將室內空氣經粗過濾器初濾,由離心風機壓入靜壓箱
,再經高效空氣過濾器精濾
,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū),從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境
。 

        (1) 側流式工作臺:空氣凈化后的氣流由左或右側通過工作臺面流向對側
,也有從上向下或從下向上流向對側,形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌
,工作臺結構為封閉式
; 

        (2) 外流式工作臺:凈化后的空氣面向操作者流動,因而外方氣流不致混入操作
,工作臺結構為開放式
,但進行有害物質實驗操作對操作者不利。超凈工作臺應需要定期請有關部門檢查潔凈度
,符合要求的超凈工作臺其潔凈度應達到100級
,用塵埃粒子計數(shù)儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應超過3.5個/L;空氣流量應控制在0.75-1.0m3/s
;細菌菌落數(shù)平均<1個
,根據(jù)無菌狀況必要時需要置換過濾器。 
細胞培養(yǎng)設備
2. 顯微鏡 

        倒置式顯微鏡是細胞培養(yǎng)實驗室日常工作常規(guī)必備設備
,主要用于日常了解細胞的生長情況并觀察有無 污染發(fā)生
。如資金允許,建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品相差顯微鏡
、解剖顯微鏡
、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等
,可隨時拍攝并記錄細胞生長情況
。 

3. 培養(yǎng)箱 

        體外培養(yǎng)的細胞和體內細胞一樣,需要在恒定的溫度下生存
,一般最適生長溫度為37℃
,溫差變化不應超過±0.5℃。溫度升高2℃時
,變不利于細胞生存
,溫度達到40℃以上細胞將很快死亡。因此
,可精 確控溫的恒溫培養(yǎng)箱
、CO2培養(yǎng)箱是佳選擇。 

        (1) 恒溫培養(yǎng)箱:應選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱
,此類培養(yǎng)箱靈敏度高
,溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價格較便宜
,其缺點是只宜于作密閉式培養(yǎng)
。 

        (2) CO2培養(yǎng)箱:目前多數(shù)的細胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點是能夠提供進行細胞培養(yǎng)時所需要的一定量的CO2(常用濃度為5%)
,易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH
,適用于開放或半開放培養(yǎng)。使用培養(yǎng)瓶時
,為使培養(yǎng)瓶內與外界保持通氣狀態(tài)
,可將瓶蓋略微旋松,為避免細胞被污染
,使用這種培養(yǎng)方式時
,培養(yǎng)箱內空氣必須保持清潔
,需定期用紫外線照射或酒精消毒,同時培養(yǎng)箱內應放置盛有無菌蒸餾水的水槽
,防止培養(yǎng)液蒸發(fā)
,保持箱內相對濕度在100%。 

        (3) 細胞培養(yǎng)耗材:培養(yǎng)細胞的器皿可用培養(yǎng)皿
、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶


4. 烘箱(干燥箱) 

        用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用
,玻璃器皿等須干熱消毒
。干熱消毒時,烘箱內溫度一般要達到160℃以上
,通常使用鼓風式烘箱
。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好
,缺點是升溫過程較慢
。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始,至100℃時
,停止鼓風
。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長
。消毒后不能立即打開箱門
,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應等溫度自然下降至100℃以下后可開門
。 

5. 水純化裝置 

        細胞培養(yǎng)對水的質量要求較高
,細胞培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)相關液體的配制用水以及清洗細胞培養(yǎng)器皿用水都必須事先經過嚴格的純化處理
。目前有多種純化方法相結合
,可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便,可掛壁式
、臺式
、可配儲水箱、也可直接用分液槍
、還可根據(jù)各類實驗用水要求選擇配置殺菌功能
,有效去除DNA酶、RNA酶
、蛋白酶等
,更有可有效去除掉熱源、內毒素的超濾型純水裝置


6. 冰箱 

        細胞培養(yǎng)實驗室必備設備
,應專用
,不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質
,且應保持清潔
。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱
。 

普通冰箱:儲存培養(yǎng)液、生理鹽水
、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品
,可短期保存組織樣本。 

        -20℃低溫冰箱
、超低溫冰箱:用于儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長時期存放的制劑
,如酶、血清等
。 

7. 細胞冷凍儲存器 

        儲存器常用的液氮容器
,根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格。選擇液氮容器時需要考慮三個因素:容積大小
、取放使用方便
、液氮揮發(fā)量。液氮容器的大小一般在25-500L
,可以儲存1ml的凍存管250-15000個左右
。液氮溫度低文帝可達-196℃,使用時應注意避免凍傷
。由于液氮易揮發(fā)
,需注意觀察剩余液氮量,及時補充
,避免液氮不足使細胞受損或死亡
。目前有許多智能型細胞冷凍儲存器可供選擇,可配置有電子控制器的液氮儲存器
,實現(xiàn)凍存自動化
;并可監(jiān)測液氮水平和樣品溫度,確保樣品溫度始終處于設定溫度點
;可配置報警系統(tǒng)
,設置液氮液面、溫度
、電池
、電壓、電源等失常情況下報警
;同時具備熱氣體旁路系統(tǒng)
,防止高于-130℃的暖空氣進入液氮罐
,從而更有效地保護樣品,防止容器內升溫
。另外
,可選擇液氮供應罐通過連接管給儲存罐補充液氮,保證樣品安全
。 

8. 離心機 

        細胞培養(yǎng)時
,通常使用離心機制備細胞懸液、調整細胞密度
、洗滌和收集細胞
。一般常規(guī)配置4000rpm臺式離心機;若要做細胞沉降
,需要使用80-100G離心力
,因為離心力過大會損傷細胞。根據(jù)不同要求
,有大容量
、可調溫度離心機、高速離心機和低溫冷凍離心機等更多功能離心機可選擇


9. 天平 

        常用的有精密天平和分析天平
。分析天平的精度一般為0.1mg、0.01mg和0.001mg
。一般根據(jù)取樣量量和精度要求選擇合適的天平:取樣量大于100mg宜選用精度0.1mg的天平
;取樣量100-10mg,選用精度0.01mg的天平
;取樣量10mg宜選用精度0.001mg的天平
。天平需要定期校準,可選擇有自動校準功能的天平
,方便維護
。天平使用需要注意清潔,避免腐蝕性粉末
、液體直接接觸稱量臺

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